Chương trình đã chuẩn bị một màn trình diễn vũ đạo điêu luyện từ bản sao bằng công nghệ AI của 6 thành viên cùng màn "đánh úp" chúc mừng sinh nhật bất ngờ mà khách mời dành cho Ngô Kiến Huy. Trong khi đó, HIEUTHUHAI bị phong ấn toàn tập khi va phải khả năng dựng chuyện tài tình của những người anh 2 Ngày 1 Đêm.
Ngay sau lời chia sẻ đầy chân thành từ khách mời Isaac, khán giả lập tức phải bật cười bởi những lời chia sẻ đầy uất ức từ Dương Lâm cùng với những màn "bóc phốt" em Út từ Kiều Minh Tuấn và Cris Phan. Câu chuyện dần trở nên cao trào hơn khi Trường Giang và Ngô Kiến Huy cùng góp lời: “Hiếu nói với anh, Kiều Minh Tuấn đứng cười một mùa thôi mà nổi tiếng”.
Kết thúc màn trình diễn D.O.C vô cùng sôi động cùng bộ ba “Tam Xà” Dương Lâm - Cris Phan - Pháp Kiều, khán giả tại Cần Thơ lại tiếp tục chứng kiến màn kết hợp lần đầu tiên từ "bộ ba U20" Trường Giang - HIEUTHUHAI - Negav với ca khúc Ngủ Một Mình. Trong quá trình tập luyện, cả ba quyết định tung ra màn kết "ending fairy" tuy nhiên lại vô cùng vất vả khi cả ba đều thở hồng hộc đến mức quên thoại khiến người xem cười nghiêng ngả.
Trong tập 60, các thành viên đã cùng nhìn ngắm những tâm tư tình cảm mà người xem từ khắp nơi gửi về cho chương trình. Ngô Kiến Huy bày tỏ: “Đối với mấy anh em, sự yêu thương của quý khán giả là động lực to lớn nhất cho chúng tôi”. Chàng Bắp cũng ra mắt bài hát hoàn toàn mới Ngoan Xinh Yêu Của Anh Đâu Rồi để chiêu đãi khán giả tại Cần Thơ.
Ở một diễn biến khác, Negav đã khiến người xem "cười khờ" bởi màn diễn xuất trong trò chơi Bon bon về miền Tây. Sau khi khẩu lệnh "qua gờ giảm tốc" được hô lên, tất cả thành viên đều liên tục thực hiện những hành động giật lắc dữ dội. Ngô Kiến Huy còn phải vượt "ổ voi". Negav cũng khiến khán giả cười nghiêng ngả khi anh chàng bất ngờ bật thẳng lên, tuy nhiên "út khờ" vẫn nhanh chóng bị loại ngay sau đàn anh Isaac.
Không chỉ hết mình trong thử thách, nam rapper còn nhiệt huyết hết cỡ trên sân khấu giao lưu 2 Ngày 1 Đêm với ca khúc mới toanh Mình Anh Thôi. Với chất nhạc melody cuốn hút, Mình Anh Thôi là tâm trạng của một chàng trai si tình gửi lời nhắn nhủ đến người thương. Ca khúc nhanh chóng chiếm trọn trái tim khán giả tại Cần Thơ.
